破碎大量樣品、低溫破碎大量樣品、破碎堅硬或韌性較強的樣品時，人工手動研磨就成了實驗猿的噩夢。當(dāng)然，也有很多實驗猿已經(jīng)嘗試過市面一些研磨機/超聲波粉碎機，發(fā)現(xiàn)自己那頑固的樣品依然無法被破碎/破碎過程損壞了目標(biāo)成分而十分心塞。

       分享個高通量破碎動植物組織和微生物的方法，別逗，當(dāng)然不是靠徒手研磨能做到的，必須入手個神器——上海凈信的tissuelyser系列和JXFSTPRP系列多樣品組織研磨機。對于動植物組織和微生物，包括一些難以破碎的組織樣品，都可以使用這個研磨機對其進行粉碎。

    特別地，一些尤其堅硬/韌性比較強的樣品，或要求維持低溫條件進行破碎提取的樣品，需要結(jié)合液氮進行研磨，如：皮膚、硬骨骼、軟骨、血管、結(jié)締組織、種子等；使用普通機械研磨方法，很難既保證研磨破碎效果又保證樣品一直處于低溫狀態(tài)，尤其是提取RNA、酶等對溫度敏感的物質(zhì)時，低溫狀態(tài)的控制顯得尤為關(guān)鍵。入手一臺上海凈信的多樣品組織研磨機，這些都不再是問題了。看招：

注：由于樣品的具體差異及實驗要求的不同，下文數(shù)據(jù)部分請咨詢廠家。

*部分 破碎動物組織

1）樣品：豬肌肉組織

2）儀器： Tissuelyser多樣品組織研磨機（品牌：上海凈信）；

耗材：***毫升離心管和直徑***毫米的研磨鋼珠

3）步驟：

a.取***克左右肌肉組織樣品，均勻地剪切成少量樣品塊，分別放入若干***毫升的研磨離心管中。

b.每個試管中放入***顆直徑***毫米的研磨鋼珠和800μL PBS裂解液，分別蓋緊管蓋后，置入24孔研磨適配器中，再將適配器固定在研磨機中。

c.將Tissuelyser多樣品組織研磨機的參數(shù)設(shè)置為***赫茲，研磨***秒，啟動研磨器。

d.研磨停止后，拿出研磨離心管，旋開管蓋，取出研磨好的肌肉組織樣品。

4）結(jié)果：

研磨后的效果如圖1，豬肌肉組織成很細膩的泥漿狀，說明Tissuelyser多樣品組織研磨機對豬肉組織的研磨效果良好。

圖1 豬肌肉研磨對比

第二部分 破碎植物組織

1）樣品：水稻葉片

2）儀器： Tissuelyser多樣品組織研磨機（品牌：上海凈信）；

耗材：***毫升離心管和直徑***毫米的研磨鋼珠

3）步驟：

a.取***克左右葉片組織樣品，均勻地剪切成少量樣品塊，分別放入若干***毫升的研磨離心管中。

b.每個試管中放入***顆直徑***毫米的研磨鋼珠，分別蓋緊管蓋后，置入24孔研磨適配器中，再將適配器固定在研磨機中。

c.將Tissuelyser多樣品組織研磨機的參數(shù)設(shè)置為***赫茲，研磨***秒，啟動研磨器。

d.研磨停止后，拿出研磨離心管，旋開管蓋，取出研磨好的葉片組織樣品。

4）結(jié)果：

研磨后的效果如圖2，葉片組織成很細膩的泥漿狀，說明Tissuelyser多樣品組織研磨機對葉片組織的研磨效果良好。順帶附上研磨黃豆（堅硬的植物種子）的研磨對比圖。

圖2 水稻葉片研磨對比

圖3 黃豆研磨對比

第三部分 結(jié)合液氮使用凈信tissuelyser研磨機

    當(dāng)樣品死活無法破碎/樣品傲嬌要低溫環(huán)境時，上海凈信Tissuelyser多樣品組織研磨機+液氮=問題輕松解決。以血管和植物葉片為例，具體操作方法如下：

 血管：

    取0.1克新鮮血管，用剪刀剪成若干小塊，然后放入2毫升離心管中，加入1顆6mm研磨鋼珠，蓋上管蓋。將整個試管放入液氮中冷凍1分鐘左右或直到液氮不沸騰，然后放入機器處理30秒鐘。取出樣品管可見樣品被破碎成乳白色粉末，然后加入提取緩沖液，可以進行接下來的后續(xù)提取，加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直處于-20℃以下。

 葉片：

    取0.2克植物葉片，清潔葉片表面后放入離心管中，加入1顆直徑5mm不銹鋼研磨鋼珠，蓋上管蓋。將整個試管和適配器放入液氮中冷凍1分鐘左右或直到液氮不沸騰，然后取出放入研磨機器中機器處理30秒鐘。取出樣品管可見葉片被破碎成綠色粉末，然后加入提取緩沖液，進行接下來的后續(xù)提取即可，加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直處于-20℃以下。

后記

       想入手這個神器，但又對研磨效果有所猶疑的小伙伴，現(xiàn)在上海凈信部分研磨機產(chǎn)品可申請試用，是時候下手了。激動人心的還有，近期研磨機好價，試用爽了直接入手一臺也是毫不含糊的。詳情可致電或，亦可瀏覽http://www.tissuelyser。。ｃｏｍ/了解更多。